内毒素检测知多少?(下篇)
<%=NSW.OConfig.GlobalConfig.SiteName %>
欢迎访问西宝生物官网 ! 股票代码:837709

西宝生物

西宝生物中国生命科学领域优选服务商!

全国服务热线:400-021-8158

24小时短信服务: 13917439331

您是否在搜:岩藻糖 | 修饰性PEG | 维生素K2 | 玛卡提取物 | 食品安全 | 二噁英检测

当前位置:首页 » 资讯中心 » 生命科学

内毒素检测知多少?(下篇)

来源:作者:人气:-发表时间:2019-10-29 13:06:00【
内毒素检测
内毒素知多少?
上一篇小编和大家一起探讨了关于内毒素的部分问题:
  • 什么是内毒素?
  • 关于内毒素的检测方法?
  • 内毒素检测用具的要求?
关于内毒素的其他问题可随时咨询西宝生物科技(上海)股份有限公司科研团队
咨询订购热线:400-021-8158!
这篇文章请跟随小编继续探讨关于内毒素的其他常见问题
【内毒素标准品】
根据检测目的使用适当类型的内毒素标准品。
•需符合BET(美国药典/ 欧洲药典 / 日本药典)的检测,例如药品和医疗器械的产品最终检验
→必须使用美国药典,欧洲药典或日本药典标准的内毒素国家标准品。
•对材料,工艺流程和其他相关主题的检测
→可以使用内毒素工作标准品(CSE)。
【样本干扰】
有时候需要采取预防措施,以防止样本对内毒素检测有潜在影响(反应干扰)。这些干扰分为以下两种类型:
(1)对LAL试剂的干扰
>•蛋白变性剂(例如酸,碱,尿素,表面活性剂,有机溶剂)
•蛋白酶和蛋白酶抑制剂
•螯合剂(会清除反应所需的钙和镁)
•对于比色法:着色物质(在约405 nm处具有相当大吸收的物质)
•对于比浊法:浊度
(2)对内毒素的干扰
•金属离子(例如铁,铝,镓和铬离子。即使微摩尔级别的存在也会对测试产生影响)
•表面活性剂
样本的干扰效果可以通过进行药典中的干扰因子测试来衡量:即通过对加标了已知量的内毒素的样本进行检测,获得加标内毒素的回收率。如果回收率在50%至200%范围内,则可以确定该样本不会造成影响,换句话说,检测所得的内毒素浓度是正确的。如果发现样本会造成影响,可以通过对样本溶液进行稀释,从而减少对测试的影响。然而,对样本溶液的稀释会提高了由原始溶液(预稀释溶液)的浓度转换而得的内毒素浓度值。合理的稀释倍数(最大有效稀释倍数),是根据待检测的内毒素的所需浓度以及所用LAL试剂的检测灵敏度来确定的。欲了解反应干扰因子和最大有效稀释度的详细信息,详见药典中的细菌内毒素检测。
【Limulus ES的原理(内毒素特异性试剂)】
鲎试验反应级联
图4. 鲎试验反应级联
LAL试剂和内毒素的级联反应机制如图4所示。如果反应体系中存在(1→3)-β-D-葡聚糖*,会激活G因子,引起伴有凝胶化的假阳性反应。在这种情况下,无论体系中是否存在内毒素,都会发生反应,意味着无法对内毒素进行特异性检测。为此,我们研发出Wako's Limulus ES,该产品通过在反应体系中加入过量共存的(1→3)-β-D-葡聚糖(羧甲基化凝胶多糖),从而来抑制(1→3)-β-D-葡聚糖的干扰。因此,β-葡聚糖对LAL试剂的活化受到抑制,从而使内毒素特异性检测能够进行。过量的β-葡聚糖可以抑制其自身反应的原理如图5所示:β-葡聚糖和LAL试剂之间反应的浓度范围对于整个反应而言很窄。另一方面,内毒素和鲎试剂的反应在很宽的浓度范围内都会发生,并且不受大量共存的β-葡聚糖的任何干扰。Wako的LimulusES就是根据这个原理而制作的(见图6)。
*(1→3)-β-D-葡聚糖来源于霉菌(真菌)或经纤维素滤膜过滤所得。
羧甲基化凝胶多糖和LAL反应
图5. 羧甲基化凝胶多糖和LAL反应
使用Toxinometer®(检测时间设定为99 min)和Limulus HS进行检测。
○:在99 min内检测不到凝胶的生成
●:有凝胶的生成
羧甲基化凝胶多糖对使用Limulus HS和Limulus ES进行的内毒素检测的影响
图6。 羧甲基化凝胶多糖对使用Limulus HS和Limulus ES进行的内毒素检测的影响
A:Limulus HS
B:Limulus ES
○:内毒素的系列稀释
▲:含有1 μg/mL羧甲基化凝胶多糖的内毒素系列稀释
【内毒素产品列表】
货号
品名
规格
Limulus Amebocyte Lysate PYROSTAR (TM) ES-F SINGLE TEST SENSITIVITY 0.015 EU/mL (25 LAL Reagent vials + 1 CSE vial)
鲎阿米巴样细胞裂解物PYROSTAR™ES-F单次测试 灵敏度0.015 EU/mL
25 tests
Limulus Amebocyte Lysate PYROSTAR ES-F MULTI TEST (without CSE)
鲎阿米巴样细胞裂解物PYROSTAR™ES-F多次测试(不含CSE)
100 tests
Limulus ES-2 Single Test wako
鲎试剂ES-2 Single(适用于溶胶凝胶法和动态比浊法)
25 tests
Limulus ES-2 Test wako
鲎试剂ES-2 (适用于溶胶凝胶法和动态比浊法)
60 tests
Limulus Amebocyte Lysate ES-II, Lyophilized
鲎试剂LAL ES-II(适用于溶胶凝胶法和动态比浊法)
2 ml×5
Limulus Amebocyte Lysate PYROSTAR ES-F/Plate (with CSE)
鲎阿米巴样细胞裂解物PYROSTAR™ES-F/板(含CSE)
160 tests
Limulus Amebocyte Lysate PYROSTAR ES-F/Plate (without CSE)
鲎阿米巴样细胞裂解物PYROSTAR™ES-F/板(不含CSE)
200 tests
Limulus Color KY Single Test wako
鲎试剂比色法KY单次测试
25 tests
Limulus Color KY Test Wako
鲎试剂比色法KY多次型
60 tests
290-33771
Toxinometer ET-6000/J Standard Set
内毒素检测仪ET-6000/J
1 set
291-35761
Toxinometer ET-7000/J Standard Set
内毒素检测仪ET-7000/J(升级版)
1 set
西宝生物大楼
西宝生物科技(上海)股份有限公司(837709.OC),2003 年成立于张江高科技园区,现已成为生命科学领域集研发、生产、贸易、进出口、技术服务一体化的综合服务商。西宝生物主营包括IVD原料,科研试剂,新材料和健康产品四大板块和服务。除自营Seebio和Canmedo(康美多)、泉养堂、五藏养生品牌外,西宝生物代理了Wako、APSC、Jackson、Ludger、Bioporto、Lumiprobe、Aalto等知名品牌。西宝生物正致力于分子诊断、转化医学、干细胞、抗衰老等研发领域,依托产学研创新平台,打造大健康产业链,以持续不竭的技术创新、稳定可靠的优质产品和专业便捷的技术服务,提供更具价值、创新性和定制化的综合解决方案,与您携手共创美好的明天。
西宝生物官网二维码 西宝生物微信服务号:iseebio 西宝生物微博:seebiobiotech
官网:www.ssznrr.com 微信服务号:iseebio 微博:seebiobiotech
西宝商城二维码 mall.ssznrr.com 微信订阅号:seebiotech 康美多官网:www.canmedo.com
商城:mall.ssznrr.com 微信订阅号:seebiotech 康美多:www.canmedo.com
此文关键字:内毒素 内毒素检测 鳌试剂
盛源彩票计划群 湖北快3 山东11选5开奖 新利彩票计划群 上海11选5开奖 澳博彩票计划群 彩788彩票计划群 易中彩票注册 568彩票计划群 广西快3走势